硕士论文-黄鳝抗菌肤hepeidin基因ORF的克隆与原核表达，排版较乱，公供参考。
第一章绪论6:1
第一节鱼类抗菌肤的研究……l
1鱼类抗菌肤的分类……
11不含半肤氨酸形成a螺旋结构
12含有多个半肌氨酸形成p折叠结构……2
13组蛋白样的抗菌肤……2
14具有糖基化修饰的抗菌肚……2
2鱼类抗菌肤的生物学活性……2
3鱼类抗菌肤的抗菌机制……3
4鱼类抗菌肤表达特异性……4
第二节抗菌肤hepeidin的研究进展……。……5
1HePcidin的分子结构……5
2HePcidin的表达调控……6
3HePcidin的功能活性……7
第三节抗菌肤基因工程及应用前景……7
l抗菌肤的基因工程……，……7
11大肠杆菌表达系统……8
12酵母表达系统……10
2应用前景……10
第四节本实验的目的意义、技术路线……n
1目的意义……。……11
2技术路线……12
第二章黄鳝hepcidin基因ORF的克隆二:…二二二二13
21材料……13
211实验材料……13
212主要试剂及仪器……，……，二，……13
22方法……巧
221hePc记in基因O盯克隆策略……巧
222hepe记in基因引物的设计……，……巧
223总RNA提取……巧
224反转录……16
225ORF扩增……，……16
226目的片段回收……17
2:27连接……17
228转化……，……18
229测序验证……18
23结果与分析……18
231总RNA提取……18
232hepe记in基因。盯克隆……19
233测序验证……19
24讨论……20
25小结……，……21
第三章H印cidin氨基酸序列的生物信息学分析一22
31材料
321网络资源
322应用软件
33方法……23
331氨基酸组成、分子量、等电点分析……23
332信号肚分析……23
333跨膜区分析……23
334疏水性分析……23
335蛋白质二级结构预测……，……23
336蛋白质三级结构预测……24
337蛋白质功能结构域分析……24
338多序列分析及基因进化分析……24
34结果与分析……，……24
341编码的氨基酸序列……24
342蛋白质基本性质分析……25
343信号肤分析……，……26
344跨膜区分析……26
345疏水性分析……，……27
346HePcidin编码蛋白质二级结构预测……28
347编码蛋白质三级结构预测……31
348结构功能域分析……犯
349同源性分析……33
35讨论……35
36小结……35
第四章黄鳝抗菌肤hepcidin原核表达载体的构建及表达一二…37
7，月矛几J八、一内j41材料
411实验材料……
412主要试剂及仪器四川农业大学硕士学位论文
42方法……，……38
421HePcidin基因原核表达载体的构建……38
422黄鳝抗菌肤hePcidin的原核表达……41
43结果与分析……43
431加酶切位点引物的PcR扩增……‘……43
432目的基因片段与表达载体pET32a(+)的双酶切鉴定……44
433重组质粒的双酶切鉴定……45
434重组表达质粒的序列鉴定……46
435重组表达蛋白的sDs一以GE鉴定……46
436IPTG浓度的优化……48
437诱导时间的优化……49
438重组蛋白可溶性鉴定……50
44讨论……52
441关于表达载体pET32a(+)……52
442关于表达菌……，……52
443含信号肤序列的hePcidin基因在pET32a(+)中不表达的原因分析……53
4:4关于表达条件的优化……53
45小结……54
第五章总结与展望

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