测定血浆中微量硒的三元包合物荧光分析法
摘要: 采用氧瓶燃烧法对血样进行破坏, 利用β-环糊精和十二烷基硫酸钠形成包合物的性质, 将4 ,5-苯并苯硒二唑包合, 建立了三元包合物荧光分析法, 不经萃取, 直接测定血浆中的硒。方法的日内精密度为5. 4%～9. 3 % ( n = 7) ; 日间精密度为3. 5 %～14. 5 % ( n = 7) ; 线性范围为10～500μg/ L ; 回收率为91. 0 %～97. 8 %。对新疆汉族、维吾尔族和沈阳汉族58 人的血样进行测定, 结果表明: 新疆汉族与沈阳汉族间血硒值无显著性差异( F = 1. 36 , P ﹥ 0. 05) ; 新疆汉族与维吾尔族间血硒值有非常显著性差异( F = 1. 01 , P ﹤ 0. 01) ; 男女间血硒值有非常显著性差异( P ﹤ 0. 01) 。
关键词: 氧瓶燃烧法; 硒; 三元包合物; 荧光分析法; 血浆
硒(Se) 是参与机体物质能量代谢和人体生长发育所必需的微量元素之一, 是人体谷胱甘肽过氧化物酶
( GSH- Px) 的重要组成部分。硒不仅在机体抗氧化过程中发挥作用, 而且对于维持细胞膜的稳定性也至关重要。许多研究揭示了硒在防癌、抗癌、预防和治疗心血管疾病、大骨节病、克山病等方面的重要作用[ 1 ] , 但硒的营养浓度与致毒浓度之间的安全范围非常狭窄, 因此硒的分析方法的研究显得愈发重要。
近年来测定血液中硒的分析方法主要有: 分子荧光法[ 2 ]、原子吸收光谱法[ 3 ]、紫外分光光度法、高效液相色谱法等。其中以原子吸收光谱法最为常用, 但其仪器昂贵且存在基体干扰等问题。荧光法检测硒具有灵敏度高、费用低的优点; 分光光度法虽费用低, 但其灵敏度不及荧光法。基于上述原因, 本实验建立了一种操作简便、费用低、可在临床上推广应用的血液中硒的荧光分析法。
本实验首次利用β-环糊精(β-CD) 和十二烷基硫酸钠(SDS) 形成包合物的性质, 将4 ,5-苯并苯硒二唑(DAN
- Se) 包合, 从而可不经萃取, 直接、快速地测定血浆中的硒含量。其次, 采用氧瓶燃烧法对样品进行预处理,避免了硒的挥发损失; 与湿法破坏相比, 无需严格控制破坏终点, 操作简便、省时[ 4 ]。

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